Me pehea te whiriwhiri PCR/qPCR paunga?

He tikanga tairongo, whai hua hoki te PCR mo te whakakaha i te kape kotahi o te raupapa DNA i whaaia ki nga miriona kape i roto i te wa poto. No reira, me noho kore he poke me te aukati i nga taonga kirihou mo nga tauhohenga PCR, i te mea he kounga teitei ka taea te whakamana i te painga PCR pai rawa atu. Kei te waatea nga taputapu kirihou PCR i roto i nga momo rahi me nga whakatakotoranga, ma te mohio ki nga ahuatanga tika o nga hua ka awhina koe ki te whiriwhiri i nga taputapu kirihou tika mo nga raraunga PCR me te qPCR tino pai.

Te tito me nga ahuatanga o nga taputapu PCR

1.Materi
Ko nga mea pau PCR he mea hanga mai i te polypropylene, he ngoikore ki te tu i nga huringa pāmahana tere i roto i te waa o te paihikara waiariki me te whakaiti i te tangohanga o nga matū tauhohenga ki te whakarite i nga hua PCR tino pai. me whakamahi nga rauemi mata-a-te-rorohiko me te kounga teitei i te wa o te whakaputanga me te hanga i roto i te akomanga 100,000 ruma horoi. Ko te hua me kore he karihi me te parahanga DNA kia kore ai e pokanoa ki te paanga o nga whakamatautau whakakaha DNA.

2.Tae
Pereti PCRangongo PCRe wātea ana i roto i te mārama me te ma.

• Ko te hoahoa matotoru o te pakitara rite ka whakarato i te whakawhitinga wera rite mo nga tauira tauhohe.

• Ko te kaha o te mata o te mata hei whakarite i te tuku tohu fluorescence tino pai me te iti o te korikori.

• I roto i nga whakamatautau qPCR, na te kohao ma i aukati i te hurihanga o te tohu rewharewha me tona whakaurunga e te waahanga whakawera.

3.Whakahōputu
Kei te taha o te papa te Pereti PCR. Ko te remu he pai ake te pumau mo te mahi paipa i te wa e hangaia ana te punaha tauhohenga, me te pai ake o te kaha miihini i roto i te maimoatanga miihini aunoa. Ka taea te wehea te pereti PCR ki te kore remu, te haurua remu me te remu katoa.

• Kei te ngaro te pereti PCR kore reeti huri noa i te pereti, a ko tenei ahua o te pereti tauhohenga ka taea te urutau mo te nuinga o nga taputapu PCR me nga waahanga taputapu PCR i te waa, engari kaua mo nga tono aunoa.

• He tapa poto te pereti PCR haurua ki te taha o te pereti, he pai te tautoko i te wa o te paipa me te kaha miihini mo te whakahaere karetao.

• Ko te pereti PCR tino remu he tapa e hipoki ana i te teitei o te pereti. He pai tenei ahua pereti mo nga mahi aunoa, ka taea te noho haumaru me te pumau. Ko te remu katoa ka whakarei ake i te kaha miihini, he pai mo te whakamahi me nga karetao i roto i nga rerenga mahi aunoa.

Kei te waatea te ngongo PCR i roto i te ngongo kotahi me te ngongo 8-taapiri, he pai ake mo nga whakamatautau PCR/qPCR iti ki waenga waenga. Ko te uhi papatahi kua hangaia hei whakahaere i te tuhi, a ko te tuku pono nui o te tohu fluorescence ka pai ake te mohio e te qPCR.

• Ko te ngongo kotahi e whakarato ana i te ngawari ki te whakarite i te maha o nga tauhohenga. Mo te nui ake o nga pukapuka tauhohenga, kei te waatea he ngongo kotahi i te 0.5 mL te rahi.
• Ko te ngongo 8-strips me nga potae ka tuwhera me te kati i nga ngongo tauira hei aukati i te tauira.

4. hiri
Ko te uhi ngongo me te kiriata hiri me tino hiri te ngongo me te pereti hei aukati i te whakaetonga o te tauira i roto i te huringa waiariki. Ka taea te hiri ki te hiri ma te whakamahi i te kirikiri kiriata me te taputapu perehi.

• Ko nga puna pereti PCR he mata teitei a tawhio noa. Ka awhina tenei hoahoa ki te hiri i te pereti ki te kiriata hiri hei aukati i te whakaetonga.
• Ko nga tohu alphanumeric i runga i te pereti PCR ka awhina ki te tautuhi i nga puna takitahi me nga waahi o nga tauira e rite ana. Ko nga reta pupuhi ka taia ki te ma, ki te pango ranei, a mo nga tono aunoa, he pai ake te reta mo te hiri i nga taha o waho o te pereti.

tono 5.Flux

Ko te rerenga whakamatautau o nga whakamatautau PCR / qPCR ka taea te whakatau ko tehea momo taonga kirihou hei whakamahi mo te painga maimoatanga pai. Mo nga tono urunga iti-ki-te-tikanga, he pai ake nga ngongo, engari ko nga pereti he pai ake mo te whakamatautau puta waenga-ki-teitei. He mea hoahoa ano nga pereti ki te whakaaro ki te ngawari o te rere, ka taea te wehea ki te takai kotahi.

Hei whakamutunga, hei waahanga nui o te hanga punaha PCR, he mea nui nga taonga kirihou mo te angitu o nga whakamatautau me te kohinga raraunga, ina koa i roto i nga tono rerenga mahi reo-ki-te teitei.

Hei kaiwhakarato Hainamana mo nga taputapu kirihou aunoa, ka tukuna e Cotaus nga tohutohu pipette, waikawa karihi, tātari pūmua, ahurea pūtau, rokiroki tauira, hiri, chromatography, etc.

Paatohia te taitara hua ki te tiro i nga taipitopito hua mo te paunga PCR.

Pupu PCR ;Pereti PCR